TÉCNICAS DE ANÁLISIS HEMATOLÓGICO

 PRÁCTICA: TIEMPO DE TROMBOPLASTINA PARCIAL ACTIVADA (TTPA) Objetivos Medir el tiempo de tromboplastina parcial activada Fundamento El tiempo de tromboplastina parcial activada permite valorar la vía intrínseca de la coagulación al poner en marcha in vitro el proceso empleando como desencadenante un factor activador de esa vía. Se usa para monitorizar las terapias anticoagulantes con heparina. Provocamos que un PPP coagule usan cefalina (suspensión de fosfolípidos obtenida del cerebro de animales) como sustituto del F3p + activador (sustancia cargada negativamente) + Ca+2. Materiales - Micropipetas y puntas de pipeta - Varillas de acero - Coagulómetro - Tubos Eppendorf Técnica 1. Introducir varilla de acero en cada una de la cubetas del coagulómetro, una con M (muestra) y otra con C (control). 2. Atemperar muestras, control y reactivos a 37ºC durante 5-10 min y homogeneizarlos suavemente. 3. Verter 100 microL de muestra en M y otros 100 microL de control en C. 4. Añadir a lo anteri...

PRÁCTICA: TIEMPO DE PROTROMBINA O TIEMPO DE QUICK Objetivos Medir el tiempo de protrombina Fundamento El PT mide el tiempo que tarda en coagular un PPP (citratado) cuando se provoca la coagulación al añadir tromboplastina hística y Ca+2. Los factores extrínsecos de la coagulación se activan en presencia de tromboplastina cálcica en plasma citratado. Se determina el tiempo de coagulación del plasma después de añadir el reactivo. Sirve para valorar trastornos de la coagulación y valorar la terapia con anticoagulantes. Valora las anomalías cuantitativas/cualitativas en los factores de la vía extrínseca y común de la coagulación (II, V. VII, X y fibrinógeno). También es un indicador de enfermedades hepáticas. Cuando una persona está sometida a anticoagulantes orales, los tiempos están alargados. Se usa para el tratamiento adecuado de Sintrom (acenocumarol). Materiales - Micropipetas - Varillas de acero - Micropipetas y puntas de pipeta - Coagulómetro - Tubos Eppendorf Técnica 1. Preparació...

 PRÁCTICA: TEST DE HOWELL Objetivos El test de Howell es una prueba que mide el tiempo que tarda en coagularse un plasma rico en plaquetas (PRP), que se obtiene al centrifugar sangre anticoagulada con citrato sódico a 3.000 rpm durante 10 minutos. Fundamento El resultado del test de Howell es el tiempo que pasa desde que le hemos añadido CaCl 2  (Cloruro cálcico) al plasma rico en plaquetas (PRP) hasta su coagulación. Material - Centrífuga - Pipeta Pasteur - Vaso de precipitado - Tubos Eppendorf - Rotulador de vidrio - Pipetas automáticas y puntas de pipeta Reactivos - Solución salina al 0'85% - Solución de cloruro cálcico 0'025 M - Pool de plasmas normal Técnica 1. Atemperar los reactivos y la muestra, a 37ºC. Para ello, deben situarse estos en un baño de agua a 37ºC durante 5 a 15 minutos. 2. Rotular un tubo de hemólisis con la letra M (muestra) y otro con la letra C (control) 3. Introducir los tubos en el baño de agua. 4. Depositar 0'1 ml de muestra, en el tubo M, y 0...

 PRÁCTICA: PRUEBAS DE SANGRÍA O HEMORRAGIA 1. TIEMPO DE SANGRÍA POR EL MÉTODO DE DUKE Objetivos Conocer el tiempo de sangría mediante la exploración de la fase vascular  y plaquetaria de la hemostasia de un paciente. Fundamento Esta prueba se realiza para comprobar la reacción de los pequeños vasos ante una lesión, lo que depende de la integridad de la pared vascular, de su capacidad constrictora y del número, y la calidad, de las plaquetas que formarán el tapón hemostático. Se efectúa la prueba en el lóbulo de la oreja, tras hacer una punción con una lanceta desechable, mientras que el método de Ivy se realiza en el antebrazo, el cual se hallará sometido a presión. Técnica Desinfectar con alcohol de 70º la zona donde se realizará la punción. Dejar secar la zona. Realizar la punción sin presionar la zona. Con un círculo de papel de filtro, usando el borde y « de canto «, tomar contacto con la gota para que el papel la absorba, teniendo especial cuidado de no contactar directam...

  PRÁCTICA: PRUEBA DE RUMPEL-LEEDE OBJETIVO Evaluar la resistencia que ofrecen las paredes capilares al aumento de la presión intracapilar y a la anoxia. FUNDAMENTO Se basa en la aplicación de presión a través de un torniquete , durante un tiempo determinado y observar si aparecen o no petequias. MATERIAL NECESARIO ·          Bolígrafo ·          Esfigmomanómetro ·          Fonendoscopio ·          Reloj DESARROLLO DE LA PRÁCTICA Observar la presencia de petequias antes de comenzar la prueba. Medir la presión arterial del paciente y calcular la media entre la presión arterial sistólica y diastólica. Trazar un círculo de unos 5cm de diámetro en la cara anterior del brazo. Colocar el manguito del esfigmomanómetro en el brazo seleccionado e insuflar aire, hasta ejercer...

 PRÁCTICA 21: RECUENTO DE PLAQUETAS EN CÁMARA DE NEUBAUER OBJETIVO Aprender a contar plaquetas con una cámara de recuento Neubauer .   FUNDAMENTO Para el recuento de plaquetas en cámara, se diluye la muestra de sangre en un líquido apropiado, depositando la mezcla, posteriormente, en la cámara de recuento para su observación.   MATERIAL NECESARIO Microscopio Tubo de ensayo Micropipeta Pipeta de 2ml Prepipeta Gradilla Cámara de recuento neubauer Cubreobjetos Placa de petri Papel de filtro   REACTIVOS Agua destilada Líquido de dilución laboratorios Spinreact u Oxalato amónico al 1%.   MUESTRA Sangre venosa anticoagulada   DESARROLLO DE LA PRÁCTICA Vertemos en tubo de ensayo 0,99 ml aproximadamente de líquido de dilución, con ayuda de una pipeta. Añadimos 0,01ml de la sangre problema con ayuda de una micropipeta. El objetivo es una dilución 1/100 ...

  PRÁCTICA 20: HYDRAGEL HB K20 Ø   Número de Procedimiento/técnica:   20 Ø   Denominación: Hydragel Hb K20 Ø   Nombre del técnic@ que lo realiza: Araceli Alejandra Rojas Arispe Ø   Grupo de trabajo: Ainhoa Castro Larrauri y Araceli Alejandra Rojas Arispe   Preparación de las muestras • Centrifugue la sangre no coagulada a 5 000 r.p.m. durante  5 minutos. • Deseche el plasma. • Lave los glóbulos rojos 2 veces con 10 volúmenes de solución salina; tenga mucho cuidado al procesar volúmenes de glóbulos rojos inferiores a 10 ml. • Hemolice 10 µl de glóbulos rojos empaquetados con 130 µl de Solución Hemolizante. • Agite en el vórtex durante 10 segundos e incube durante 5 minutos a temperatura ambiente. NOTAS : ·        El hemolizado no necesita ser filtrado o centrifugado. ·        La solución hemolizante de Sebia no afecta a la inestable hemoglobina de Bar...