PRÁCTICA: TIEMPO DE TROMBOPLASTINA PARCIAL ACTIVADA (TTPA)

 PRÁCTICA: TIEMPO DE TROMBOPLASTINA PARCIAL ACTIVADA (TTPA)

Objetivos

Medir el tiempo de tromboplastina parcial activada

Fundamento

El tiempo de tromboplastina parcial activada permite valorar la vía intrínseca de la coagulación al poner en marcha in vitro el proceso empleando como desencadenante un factor activador de esa vía.

Se usa para monitorizar las terapias anticoagulantes con heparina.

Provocamos que un PPP coagule usan cefalina (suspensión de fosfolípidos obtenida del cerebro de animales) como sustituto del F3p + activador (sustancia cargada negativamente) + Ca+2.

Materiales

- Micropipetas y puntas de pipeta

- Varillas de acero

- Coagulómetro

- Tubos Eppendorf

Técnica

1. Introducir varilla de acero en cada una de la cubetas del coagulómetro, una con M (muestra) y otra con C (control).

2. Atemperar muestras, control y reactivos a 37ºC durante 5-10 min y homogeneizarlos suavemente.

3. Verter 100 microL de muestra en M y otros 100 microL de control en C.

4. Añadir a lo anterior 100 microL de cefalina caolín.

5. Mezclar bien el contenido de cada cubeta, puede hacerse mediante aspiraciones sucesivas de la muestra.

6. Incubar la muestra a 37ºC durante 5 min (en placa calefactora del coagulómetro).

7. Colocar sucesivamente cada una de las cubetas en la celda de medida del coagulómetro y agregar 100 micrL de CaCl2 0'025 M. Comienza la lectura.

Resultados

Los valores normales están comprendidos entre 30 y 40 segundos.

Se considera anormal un TTPA de la muestra superior, en más de 8 segundos al de control.

TTPA muestra en s = 32'9 s

TTPA control en s = 51'9 s

Tasa de TTPA o ratio = TTPA muestra en s / TTPA control en s = 32'9 s/ 51'6 s = 0'64 

Según los resultados, se encuentra dentro de los valores normales (<1'2)

Una tasa > 1'5 se deduce que hay un déficit de factores de la vía intrínseca y riesgo de hemorragia.