PRÁCTICA: TEST DE HOWELL

 PRÁCTICA: TEST DE HOWELL

Objetivos

El test de Howell es una prueba que mide el tiempo que tarda en coagularse un plasma rico en plaquetas (PRP), que se obtiene al centrifugar sangre anticoagulada con citrato sódico a 3.000 rpm durante 10 minutos.

Fundamento

El resultado del test de Howell es el tiempo que pasa desde que le hemos añadido CaCl2 (Cloruro cálcico) al plasma rico en plaquetas (PRP) hasta su coagulación.

Material

- Centrífuga

- Pipeta Pasteur

- Vaso de precipitado

- Tubos Eppendorf

- Rotulador de vidrio

- Pipetas automáticas y puntas de pipeta

Reactivos

- Solución salina al 0'85%

- Solución de cloruro cálcico 0'025 M

- Pool de plasmas normal

Técnica

1. Atemperar los reactivos y la muestra, a 37ºC. Para ello, deben situarse estos en un baño de agua a 37ºC durante 5 a 15 minutos.

2. Rotular un tubo de hemólisis con la letra M (muestra) y otro con la letra C (control)

3. Introducir los tubos en el baño de agua.

4. Depositar 0'1 ml de muestra, en el tubo M, y 0'1 ml de control comercial o pool de plasmas, en el tubo C.

5. Añadir 0'1 mL de solución salina al 0'85% al contenido de cada uno de los tubos.

6. Agregar a la mezcla anterior, 0'1 ml CaCl2 0'025 M y, simultáneamente, poner en marcha los cronómetros.

7. Coger los tubos por su extremo superior y, sin retirarlos del agua, inclinarlos hacia delante y hacia atrás, a un ritmo de una inclinación por segundo.

8. Para el cronómetro cuando se vea la aparición de un enturbiamiento y  de solidificación de la mezcla de plasmas y reactivos.

Resultados

Los valores normales están comprendidos entre 90 y 130 segundos.

La mezcla con citrato sódico tardó en solidificar 7 minutos (420 segundos). Este resultado se debe a que nuestro pool de plasma estaba muy deteriorado.

El resultado del test de Howell es un tiempo mayor al normal en déficits de factores de la vía intrínseca (por ejemplo, la hemofilia), en situaciones de afibrinogenemia (Falta de fibrinógeno en la sangre a causa de un exceso en su consumo o por un defecto en su producción) y de hiperfibrinolisis, y en terapias con heparina.