PRÁCTICA: RECUENTO LEUCOCITARIO

 PRÁCTICA: RECUENTO LEUCOCITARIO

1. OBJETIVOS

- Realizar un recuento de glóbulos blancos

2. FUNDAMENTO

El recuento de leucocitos mediante cámara consiste en determinar el número de ellos presentes en un volumen determinado de sangre diluida. A esta muestra se le lisan los hematíes para facilitar la visualización y recuento de leucocitos. La muestra de sangre se diluye lo suficiente para que los leucocitos estén separados unos de otros y así poder contarlos. El recuento se realiza en una cámara de Neubauer o similar de dimensiones conocidas.

La profundidad de la cámara es de 0,1 mm. Los cuadrados de las esquinas miden 1 mm2 de superficie y están subdivididos en 16 cuadrados más pequeños de 0,25 mm de lado. El cuadrado del centro está dividido en 16 cuadrados de 0,2 mm de lado y éstos a su vez están subdivididos en 16 cuadrados de 0,05 mm de lado.

En el recuento de leucocitos se emplean líquidos de dilución que lisan los hematíes. El diluyente más utilizado es el líquido de Türk, que contiene ácido acético glacial con la finalidad de destruir los hematíes. Este líquido está compuesto por ácido acético glacial, violeta de genciana al 1% y agua destilada.

Los valores de referencia en el recuento de leucocitos son de 5000-10000 leucocitos/mm3.

Cuando los valores son superiores a los de referencia estamos ante una leucocitosis. Y si son inferiores estaremos ante una leucopenia.

3. MATERIALES Y REACTIVOS

• Pipeta de 2 ml
• Micropipeta automática de 20 microlitros
• Puntas de micropipeta
• Guatis
• Cubreobjetos
• Cámara de Neubauer
• Tubo de ensayo
• Microscopio óptico
• Sangre anticoagulada con EDTA
• Líquido de Türk

4. TÉCNICA

1. Realizar una dilución 1/20 en 2 ml (1900 microlitos de diluyente + 100 microlitros de muestra de sangre)

2. Cargar 10 microlitros en la cámara de Neubauer

3. Dejar reposar 2 minutos.

4. Observar al microscopio

5. RESULTADOS Y CONCLUSIONES

Se han observado un total de 110 leucocitos

WBC = (Nº GB/4) x 10 x 20

WBC = (110/4) x 10 x 20 = 5500 leucocitos/mm cúbico de sangre.

El resultado se encuentra dentro de los valores normales.