PRÁCTICA: DETERMINACIÓN FENOTIPO Y GENOTIPO DEL SISTEMA RH

 PRÁCTICA: DETERMINACIÓN FENOTIPO Y GENOTIPO DEL SISTEMA RH

1. OBJETIVOS

Determinar el genotipo (más probable) y fenotipo de una persona, obtenido mediante el siguiente procedimiento.

2. FUNDAMENTO

El genotipo de una persona es su dotación genética en el cromosoma, y el fenotipo es la manifestación de ese genotipo. El fenotipo puede ser idéntico al genotipo.
Dado que no existe el antígeno d, ni el anticuerpo anti-d, es imposible determinar si el antígeno D es homozigoto o heterozigoto mediante su detección en los hematíes. Determinamos el genotipo más probable.
El interés en la determinación del genotipo se debe a que existen casos de madres inmunizadas frente a D, y conviene conocer si el padre es o no homozigoto para D, antes de producirse un nuevo embarazo. Un padre homozigoto D, transmitirá el gen D a todos sus hijos, mientras que uno heterozigoto lo transmitirá con un 50% de probabilidades.
El fenotipo se determina enfrentando los hematíes problema con los antisueros anti-D, anti-C, anti-E, anti-c y anti-e. El genotipo más probable dependerá de la raza o el grupo étnico.
El genotipo del sistema Rh se enfrentan los hematíes problema a distintos antisueros dirigidos contra los antígenos que componen el sistema Rh. La existencia o no de estos antígeno en la superficie de los hematíes, se detecta por una reacción de aglutinación. Los resultados se trasladan a una tabla donde vemos los posibles genotipos:

3. MATERIALES y REACTIVOS

• Centrifuga
• Rotulador
• Vaso de precipitado para residuos
• Tubos de centrifuga
• Pipeta pasteur
• Papel de filtro
• Bata
• Guantes
• Suero anti-D
• Suero anti-E
• Suero anti-C
• Suero anti-e
• Suero anti-c
• Solución salina fisiológica

4. PROTOCOLO

1. Lavamos tres veces los hematíes con solución salina fisiológica y preparamos una solución al 5%.

2. Rotulamos los 5 tubos de centrifuga , cada uno con la letra D,C,E,c y e.

3. Añadimos una gota de antisuero y dos gotas de suspensión de hematíes al 5%.

4. Movemos suavemente.

5. Centrifugamos durante 1 minuto a 1000 rpm.

6. Observar si hay aglutinación. Si es necesario al microscopio

5. RESULTADOS

Suspensión al 5%

Los resultados fueron los siguientes:

Tubo D:Aglutinación (positivo)

Tubo C: Aglutinación (positivo)

Tubo E: Aglutinación (positivo)

Tubo c: No hay aglutinación (negativo)

Tubo e: No hay aglutinación (negativo)

Según la tabla de Fisher-Race, los genotipos posibles son: DCE/DCE ó DCE/dCE