PRÁCTICA 8: TINCIÓN DE MAY-GRUMWALD - GIEMSA

 PRÁCTICA 8: TINCIÓN DE MAY-GRUNWALD - GIEMSA

Ø  Número de Procedimiento/técnica: 8 

Ø  Denominación: Tinción de May- Grunwald - Giemsa

Ø  Nombre del técnic@ que lo realiza: Araceli Alejandra Rojas Arispe

Ø  Grupo de trabajo: Ainhoa Castro Larrauri y Araceli Alejandra Rojas Arispe

 

1.     Fundamento

tinción de tipo Romanowsky, con el reactivo de May-Grunwald y el de Giemsa.

2.     Material, aparataje y reactivos

1. Microscopio óptico.
2. Portaobjetos.
3. Pipeta Pasteur de vidrio, de plástico o frasco cuentagotas.
4. Cristalizador.
5. Frasco lavador.
6. Puentes.
7. Reactivo de May Grunwald.
8. Reactivo de Giemsa.

3.     Protocolo

1. Preparar una extensión muy fina y dejar secar al aire libre

2. Fijarla con metanol durante 3 minutos.

3. Diluir 1 mL de Eosina-azul de metileno solución según May - Grumwaldcon 1 mL de solución tampón pH 7'2. Mezclar bien.

4. Cubrir la preparación con el colorante diluido, dejando actuar de 2 a 3 minutos.

5. Escurrir el exceso de colorante y, sin lavar, añadir Azur - Eosina - Azul de metileno solución según Giemsa diluido de 1:10 a 1:20 con tampón, solución pH 7'2 durante 15 minutos.

5. Diferenciar en agua destilada por agitación durante 5 segundos.

7. Observar al microscopio con objetivo de inmersión.

1.     Observaciones

EJERCICIOS:

¿Cómo se ve la muestra?

Los eritrocitos presentan un color rosa asalmonado.

El citoplasma del neutrófilo es de color rosa pálido y núcleo violeta.

¿Qué células identificas y cómo?

Se observa un neutrófilo por sus múltiples lobulaciones