PRÁCTICA 7: TINCIÓN DE WRIGHT

 PRÁCTICA 7: TINCIÓN DE WRIGHT

Ø  Número de Procedimiento/técnica: 1

Ø  Denominación: Metódicas de laboratorio 

Ø  Nombre del técnic@ que lo realiza: Araceli Alejandra Rojas Arispe

Ø  Grupo de trabajo: Ainhoa Castro Larrauri y Araceli Alejandra Rojas Arispe

 

1.     Fundamento

Este colorante se diferencia principalmente del anterior, en la presencia de metanol en su composición, por lo que nos ahorraremos el paso previo de fijación antes de teñir la muestra.

El colorante está compuesto de azul de metileno (que tiñe de color azul las partes ácidas de las células) y eosina (que tiñe las partes alcalinas), disueltos en metanol (que permite la fijación de las células).

2.     Material, aparataje y reactivos

 ·         Microscopio óptico

·         Tubo de ensayo

·         Pipeta pasteur con chupete

·         Cristalizador

·         Puente de tinción

·         Frasco lavador

·         Dos portas limpios

·         Cubreobjetos

·         Muestra de sangre

·         Colorante Wright

·         Solución tampón pH 7,2

·         Aceite de inmersión

3.     Protocolo

·         Realizamos un frotis sanguíneo que dejamos secar.

·         Colocamos la extensión en el cristalizador, sobre el puente de tinción y añadimos el colorante de Wright con ayuda de una pipeta pasteur.

·         Dejamos actuar un minuto, escurrimos y enjuagamos con solución tampón.

·         Lo colocamos en posición vertical hasta que escurra y se seque.

·         En un tubo de ensayo preparamos 0,5ml de Wright, con 0,5ml de solución tampón.

·         Mezclamos y aplicamos la dilución sobre la muestra, que dejaremos actuar sobre 3-5 minutos.

·         Escurrimos el exceso de colorante y enjuagamos con agua destilada.

·         Lavamos de nuevo con solución tampón.

·         Dejamos escurrir y secar otra vez en posición vertical.

·         Una vez seca la muestra, le colocamos un cubre encima y aceite de inmersión sobre este.

1.     Observaciones

EJERCICIOS

1.   ¿Qué tipo de colorante utilizamos en la tinción? Eosina-azul de metileno- azur B

2.   ¿Qué sustancia empleamos como fijador? Metanol presente en el colorante

3.   ¿Cuánto tiempo debe estar en contacto el frotis con el colorante diluido? 3-5 minutos