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PRÁCTICA: RECUENTO LEUCOCITARIO

 PRÁCTICA: RECUENTO LEUCOCITARIO 1. OBJETIVOS - Realizar un recuento de glóbulos blancos 2. FUNDAMENTO El recuento de leucocitos mediante cámara consiste en determinar el número de ellos presentes en un volumen determinado de sangre diluida. A esta muestra se le lisan los hematíes para facilitar la visualización y recuento de leucocitos. La muestra de sangre se diluye lo suficiente para que los leucocitos estén separados unos de otros y así poder contarlos. El recuento se realiza en una cámara de Neubauer o similar de dimensiones conocidas. La profundidad de la cámara es de 0,1 mm. Los cuadrados de las esquinas miden 1 mm 2   de superficie y están subdivididos en 16 cuadrados más pequeños de 0,25 mm de lado. El cuadrado del centro está dividido en 16 cuadrados de 0,2 mm de lado y éstos a su vez están subdivididos en 16 cuadrados de 0,05 mm de lado. En el recuento de leucocitos se emplean líquidos de dilución que lisan los hematíes. El diluyente más utilizado es el líquido de Türk, que

PRÁCTICA: DETERMINACIÓN DE UN Du (VARIANTE DÉBIL)

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  PRÁCTICA: DETERMINACIÓN DE UN Du 1. OBJETIVOS Determinar la presencia de un Du en la superficie eritrocitaria. 2. FUNDAMENTO El Du es un antígeno D débil, que no suele dar la cara en pruebas normales para el Rh. Primero , sensibilizaremos los hematíes problema con un suero con anticuerpos anti-D. Segundo , Los enfrentaremos al suero de Coombs. Si existe el antígeno Du en la superficie de los eritrocitos, se producirá la unión de los anticuerpos anti-D a sus receptores de membrana. Esto dará lugar a la aglutinación en presencia del suero Coombs, en una segunda fase. 3. MATERIALES Y REACTIVOS 2 Tubos de centrífuga (Uno para compensar) Centrífuga Pipetas pasteur Gradilla Baño de agua Cronómetro Vaso de precipitado Pipeta de vidrio Prepipeta Suero anti-D humano Suero de Coombs Suero fisiológico 4. PROTOCOLO 1. Realizamos la prueba de Rh en porta entre las muestras buscando un Rh –. 2.  Echamos en un tubo de hemólisis una gota de suero anti-D y

PRÁCTICA: DETERMINACIÓN FENOTIPO Y GENOTIPO DEL SISTEMA RH

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  PRÁCTICA: DETERMINACIÓN FENOTIPO Y GENOTIPO DEL SISTEMA RH 1. OBJETIVOS Determinar el genotipo (más probable) y fenotipo de una persona, obtenido mediante el siguiente procedimiento. 2. FUNDAMENTO El genotipo de una persona es su dotación genética en el cromosoma, y el fenotipo es la manifestación de ese genotipo. El fenotipo puede ser idéntico al genotipo. Dado que no existe el antígeno d, ni el anticuerpo anti-d, es imposible determinar si el antígeno D es homozigoto o heterozigoto mediante su detección en los hematíes. Determinamos el genotipo más probable. El interés en la determinación del genotipo se debe a que existen casos de madres inmunizadas frente a D, y conviene conocer si el padre es o no homozigoto para D, antes de producirse un nuevo embarazo. Un padre homozigoto D, transmitirá el gen D a todos sus hijos, mientras que uno heterozigoto lo transmitirá con un 50% de probabilidades. El fenotipo se determina enfrentando los hematíes problema con los antisueros anti-D,

PRÁCTICA: DETERMINACIÓN DE GRUPO SANGUÍNEO EN TUBOS

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 PRÁCTICA: DETERMINACIÓN DE GRUPO SANGUÍNEO EN TUBOS 1. OBJETIVOS Saber determinar el grupo sanguíneo 2. FUNDAMENTO La prueba de aglutinación en tubo es complementaria de la que se realiza en porta y sirve de confirmación de la anterior. Se prefiere la prueba en porta ya que suficientemente fiable y más rápida. Para realizar la prueba en tubo se precisa de una suspensión de hematíes para lo cual hay que realizar un lavado de hematíes previo con solución salina para evitar interferencias que pueda producir el suero. 3. MATERIALES - Tubos de centrífuga - Solución salina al 0'9% - Centrífuga - Muestra de sangre - Pipetas Pasteur - Reactivos Anti A, Anti B, Anti D y albúmina 4. PROTOCOLO 1. Lavado de hematíes 2. Suspensión de hematíes al 3% en 5 ml 3. Prueba en tubo: - Tomamos 4 tubos de centrífuga y rotulamos A, B, D y control (albúmina). - Añadimos dos gotas del reactivo correspondiente (Anti A, Anti B, Anti D, y C) más dos gotas de la suspensión de hematíes. - Centrifugamos a 1000 r

PRÁCTICA: DETERMINACIÓN DE GRUPO SANGUÍNEO EN PORTA

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 PRÁCTICA: DETERMINACIÓN DE GRUPO SANGUÍNEO EN PORTA 1. OBJETIVOS Saber determinar el grupo sanguíneo en porta 2. FUNDAMENTO Los sistemas ABO y Rh son los más importantes puesto que sus Ag/Ac son los que más reacciones produces y problemas derivados de ellos. La prueba en porta consiste en enfrentar en un portaobjetos una gota de sangre del paciente con una gota de un reactivo comercial con anticuerpos con Anti A, Anti B y Anti D comprobando si se produce aglutinación. Hay que tener en cuenta que la reacción se visualiza a temperatura ambiente para el ABO pero para el Rh mejor con calor (37ºC). 3. MATERIALES - Portaobjetos - Palillos de mezcla - Muestras de sangre - Reactivos Anti A, Anti B y Anti D  - Pipetas Pasteur 4. PROTOCOLO 1. Se divide el portaobjetos en dos partes, A y B. 2. Depositar una gota de suero Anti A y Anti B en la zona correspondiente. 3. Añadir al lado una gota de sangre previamente homogenizada. 4. Mezclar las gotas un palillo. 5. Oscilar el porta en movimiento de

PRÁCTICA: FÓRMULA LEUCOCITARIA

 PRÁCTICA: FÓRMULA LEUCOCITARIA 1. OBJETIVOS Aprender a hacer recuentos de los distintos tipos de leucocitos, con respecto a su representación total por mm3 de sangre. 2. FUNDAMENTO Los leucocitos son un componente importante de la sangre y una pieza clave en el sistema inmunológico del cuerpo. Hay cinco tipos diferentes de leucocitos, cada uno con funciones específicas. Se pueden dividir en dos tipos principales: los  granulocitos ( neutrófilos, eosinófilos y basófilos)  y  agranulocitos ( linfocitos y monocitos). La fórmula leucocitaria consiste en la determinación del porcentaje que representa cada uno de los tipos de leucocitos vistos, con respecto al total de ellos. Una máquina especialmente diseñada o el especialista, cuenta el número de cada tipo de célula. El examen muestra si el número de células está en la proporción apropiada entre sí y si hay más o menos cantidad de un tipo de célula. 3. MATERIALES - Microscopio - Portaobjetos - Pipeta Pasteur - Muestra de sangre - Aceite d

PRÁCTICA: RECUENTRO PLAQUETARIO EN FROTIS SANGUÍNEO

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PRÁCTICA: RECUENTO PLAQUETARIO EN FROTIS SANGUÍNEO 1. OBJETIVOS Determinar el número de plaquetas (PLT) presentes en un volumen determinado de sangre mediante el examen microscópico de una extensión sanguínea. Estudiar la morfología de los trombocitos. 2. FUNDAMENTO El recuento de plaquetas (PLT o PLQ) consiste en determinar el número de trombocitos presente en un volumen de sangre determinado. El recuento de plaquetas puede realizarse de forma aproximada contando los trombocitos presentes en varios campos de un frotis sanguíneo observado al microscópio. Sin embargo, también se puede hacer un recuento de plaquetas más exacto mediante el empleo de una cámara de recuento. 3. MATERIALES Y REACTIVOS Portaobjetos, microscopio y aceite de inmersión.  Tinción de May-Grünwald-Giemsa. (Puede hacerse con cualquier tinción habitual) 4. PROTOCOLO Realizar un frotis sanguíneo. Realizar la tinción de May-Grünwald-Giemsa. Colocar la extensión teñida en el microscopio. Con objetivo de 40x buscar una z