TÉCNICAS DE ANÁLISIS HEMATOLÓGICO

  PRÁCTICA 20: HYDRAGEL HB K20 Ø   Número de Procedimiento/técnica:   20 Ø   Denominación: Hydragel Hb K20 Ø   Nombre del técnic@ que lo realiza: Araceli Alejandra Rojas Arispe Ø   Grupo de trabajo: Ainhoa Castro Larrauri y Araceli Alejandra Rojas Arispe   Preparación de las muestras • Centrifugue la sangre no coagulada a 5 000 r.p.m. durante  5 minutos. • Deseche el plasma. • Lave los glóbulos rojos 2 veces con 10 volúmenes de solución salina; tenga mucho cuidado al procesar volúmenes de glóbulos rojos inferiores a 10 ml. • Hemolice 10 µl de glóbulos rojos empaquetados con 130 µl de Solución Hemolizante. • Agite en el vórtex durante 10 segundos e incube durante 5 minutos a temperatura ambiente. NOTAS : ·        El hemolizado no necesita ser filtrado o centrifugado. ·        La solución hemolizante de Sebia no afecta a la inestable hemoglobina de Bart. Procedimiento 1.      Dispense 120 m l de agua destilada o desionizada en el tercio inferior del

  PRÁCTICA 19: ESTUDIO DE LAS ANEMIAS Ø   Número de Procedimiento/técnica: 19 Ø   Denominación: Estudio de las anemias Ø   Nombre del técnic@ que lo realiza: Araceli Alejandra Rojas Arispe Ø   Grupo de trabajo: Ainhoa Castro Larrauri y Araceli Alejandra Rojas Arispe   1.      Fundamento 1. Prueba de sacarosa Consiste en situar los hematíes en un medio de baja fuerza iónica, por lo que tienden a fijar el complemento, teniendo los hematíes, frente a este, una sensibilidad anormalmente alta. En este medio, los hematíes tienden a fijar el complemento y aquellos que son especialmente sensibles se lisan con facilidad. Prueba útil en el diagnóstico de alteraciones en la membrana eritrocitaria. 2. Test de acidifiación del suero. Prueba de HAM -DACIE. El complemento es una proteína plasmática que al activarse por el complejo Ag-Ac provoca la lisis celular. Esta acción lítica es favorecida por un descenso del pH del medio (6,5-7) o de la fuerza iónica. En los hematíes no

  PRÁCTICA 18: Determinación del Fe sérico y CFTH Ø   Número de Procedimiento/técnica: 18 Ø   Denominación: Determinación del Fe    Ø   Nombre del técnic@ que lo realiza: Araceli Alejandra Rojas Arispe Ø   Grupo de trabajo: Ainhoa Castro Larrauri y Araceli Alejandra Rojas Arispe   1.      Fundamento Se trata de un método colorimétrico de la casa Spinreact (se adjunta el protocolo) que utiliza como muestra PLASMA . Primero separa el hierro de la transferrina y a través del ácido ascórbico pasarlo a ión ferroso, que en presencia de Ferrozine forma un complejo coloreado cuya intensidad es proporcional a la concentración de hierro en la muestra. El procedimiento que seguimos es primero el llenado de las cubetas (utilizar tubos después a cubetas) como se muestra en la tabla. A continuación se mezclan bien y se dejan incubar durante unos 10 minutos para por último medir su absorbancia en el espectrofotómetro. Para realizar los cálculos posteriores es importante saber